可溶性C5b-9检测:洞见补体活化,精准守护每一次免疫应答
补体激活,会留下什么踪迹?
补体激活的终末阶段,C5b、C6、C7、C8 与多个 C9 组装成攻膜复合物(MAC),在细胞膜上聚合成孔。而当它游离于体液中时,受 S 蛋白和簇集蛋白调控,仅结合一至三个 C9,不再成孔——这就是可溶性 C5b-9(sC5b-9)。作为补体终末激活的关键生物标志物,sC5b-9 与血栓性微血管病、免疫性肾病等多种补体参与的疾病发生密切相关。
检测的难题:表位选择
组成 C5b-9 的补体成分(如 C5b、C6、C7)在体液中大量以游离形式存在。若检测抗体识别的是这些成分的通用表位,游离单体将被一并检出,造成严重干扰和假阳性。因此,必须选择只在完整复合物上才出现的表位。
核心抗体 AD99:只认"新生表位"
奥根诊断的核心抗体 AD99 并不识别单体补体蛋白本身,而是只识别一个特殊的构象新生表位——该表位仅存在于聚合的 C9 上,由相邻两个 C9 亚基共同形成,单体 C9 上并不存在。
AD99 的发现源于一套严谨的杂交瘤筛选体系:以聚合 C9 免疫小鼠,将脾脏 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得数千个杂交瘤克隆;再逐一筛选,只保留"结合聚合 C9、不结合单体 C9"的克隆,最终锁定 AD99。
双抗体夹心 ELISA:双重识别,只测完整复合物
基于 AD99 的双抗体夹心 ELISA:包被于反应板的捕获抗体 AD99 特异结合聚合 C9 新生表位,检测抗体结合 C5b 结构域——两者同时命中,只有完整的 sC5b-9 复合物才会被检出。
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线性范围 15.6–250 ng/mL,覆盖正常人群下限
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批内、批间变异系数均小于 20%
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建议采集血浆样本检测:对比显示血清中 sC5b-9 浓度显著升高,非 EDTA 螯合采样会让补体在体外持续激活,直接影响结果准确性
产品与检测服务
可溶性 C5b-9 检测试剂盒采用 AD99 特异性单克隆抗体,每盒可测 96 个样本,2–8℃ 避光保存。
奥根诊断同时提供专业的 sC5b-9 检测服务,规范采样是准确检测的第一步:
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使用紫头管(K2 EDTA)采集 3 mL 外周血,采血后立即置于冷藏箱或冰上,静置 1 小时以上,全程冷藏运输至奥根诊断实验室
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血浆置换后的样本,需间隔至少 48 小时再采样
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如需先分离血浆,须在 4 小时内完成离心(4℃、1000–2000 G、10 分钟),分装后立即放入 -80℃ 冷冻,并使用干冰运送
您只需规范采样、冷链寄送,剩下的,交给奥根诊断。