奥根诊断成功研发出双色高灵敏多瘤病毒检测项目，可通过一次检测即可得到两种病毒结果，为患者节约成本和时间。

1. 联合BKV和JCV特异性序列的检测，可同时鉴别样本中是否同时含有两种病毒

以病毒序列相似的BKV、JCV、SV40的阳性样本作为DNA模板，分别进行单重荧光定量PCR检测。在BKV模板中，只有BK Taqman探针有扩增曲线（Figure 1A）；在JCV模板中，只有JC Taqman探针有扩增曲线（Figure 1B）；在SV40模板中，无“S”型扩增曲线（Figure 1C）。

Figure 1

2. 最低检出可达到102 copies

BKV、JCV重组质粒以5×101~5×107copies/µL为模板进行单重荧光定量PCR，检验该体系敏感性，由扩增曲线可以确定5×102copies/µL为最低检出量。Figure 2A为BKV病毒，Figure 2B为JCV病毒。

Figure 2

3. 多重验证，提高检测的准确性和可靠性，防止漏检

将5×104、5×105、5×106 copies/µL三个不同浓度的BKV重组质粒和JCV重组质粒作为模板，进行3次批内和批间平行试验，计算变异系数（CV）。结果如表1所示，批次内和批次间的变异系数均小于5%。

4. 单反应管双色荧光PCR检测

为验证双重定量结果是否会影响定量准确性，对不同浓度的BKV重组质粒和JCV重组质粒混合，分别进行双重荧光PCR和单重荧光PCR。结果如表2所示，双重PCR的Ct值与单重PCR无差别（p>0.05），双重荧光PCR可以准确对样本中BKV和JCV进行定量。